方法（续）BOX1：Cyclin E1状态测定Cyclin E1阳性的定义取决于目的（预测性、预后）、可用的测量（RNA、蛋白质组学、IHC）和研究设计（观察、调查、回顾性等）。由于azenosertib和其他研究药物的预测性定义（简称临床状态）仍在开发中，本研究使用交替的Cyclin E1状态定义，解释如下：•使用RNA（应用于TLOV）– TLOV患者的肿瘤仅通过RNA-SEQ进行了分析，但一部分RESET患者（n = 92）同时具有RNA-SEQ和基于临床IHC的状态– CCNE1 RNA的TLOV和RESET表达遵循相似的分布，这表明该分类器可应用于TLOV数据（图B1）–拟合了一个逻辑回归模型，从CCNE1 RNA Z-score预测丨IHC IHC状态，并使用ROC曲线分析优化分类阈值–基于CCNE1 RNA的分类器以72%的准确率预测Cyclin E1临床状态（表B1）表B1。基于RNA和临床基于IHC的周期蛋白E1状态在RESET（n = 92）子集中的一致性（n = 92）临床基于IHC的周期蛋白E1（IHC-临床cyce1）状态作为参考标准。P = 2.3e-5（n = 92）IHC-临床CYCE1 + IHC-临床CYCE1 +预测指标CCNE1 RNA高329 PPV78 %（62-89）CCNE1 RNA低1734 NPV67 %（52-79）RNA-高率= 45%（41/92）灵敏度= 65%准确度= 72% •使用研究截止（应用于RESET）– Cyclin E1阳性的研究分类定义为H-评分水平大于或等于CCNE1扩增的90%肿瘤的表达水平来自中心实验室检测导致H ≥ 145 – Cyclin E1研究状态预测Cyclin E1临床状态（专有，正在为azenosertib开发的临床定义截止值）具有92%的准确率和100%的阳性预测值（表B2）表B2。临床与研究中基于IHC的周期蛋白E1状态在RESET（n = 398）中的一致性（n = 398）临床基于IHC的周期蛋白E1状态作为参考标准P = 1.1e丨80（n = 398）IHCTERM3 ——临床CyCE1 + TERM3 ——临床CyCE1 ——预测指标TERM0 IHC IHC ——研究CycE1 + 2000 PPV100 %（98-100）IHC ——研究Cyce1-31 167 NPV 84%（79-89）IHC研究-阳性率= 50%（200/398）灵敏度= 87%准确度= 92% PPV、NPV、灵敏度、特异性、总体准确度使用双面Fisher精确检验评估统计显著性。分析子集说明•患者子集：在每个队列中，根据患者的治疗线或评估的治疗方案，使用不同的患者子集进行分析（表1）。对于生物标志物和预后分析，使用组织收集的时间和结果数据的可用性进一步选择子集如下：–生物标志物子集：包括在1L治疗结束后（对于1L队列）或在所考虑的特定线治疗开始前（对于其他队列）最多42天收集组织的患者–结果子集：在生物标志物子集内，包括可对rwPFS（TLOV）、TTNT（RESET）或ORR/DCR（两个队列）进行评估的患者。对于RESET队列，仅限于在高质量临床站点登记的患者，定义为那些在样本大小适应阈值（改编自Spiegelhalter DJ3）之下既往系统治疗信息不完整或不明确的患者比例较低的患者。患者子集定义line或regimen considered definition 1L all patients 1L-PSOC patients with more than 6mo PFI following the end of 1L 1L-PSOC + patients with more than 12mo PFI following the end of 1L1L-PROC PROC patients with less than 6mo PFI following the end of 1L2L patients who received 2L treatment 2L 丨PROC from 1L-PROC patients who received 2L treatment Taxane-PROC patients who received with relating relating 1L 1L-PROC，including taxane并不包括接受Mirv方案分析子集描述（续）数据集TLOV RESET来源Tempus Lens HGSOC RWD Azenosertib HGSOC研究纳入标准HGSOC于2022年首次接受组织转录组谱治疗HGSOC治疗MIRV治疗的组织转录组谱HGSOC用组织转录组谱PROC入组参加使用中枢cyclin E1 TERMN 22070320生物标志物亚群1L 1L PSOC 1L PSOC + 1L PROC 2L Taxane TERM0PROC Mirv 1L 1L PSOC 1L PSOC + 1L PROC 2L Taxane Mirv N 2031237630981370273RNA-seq表达分类器（BOX1）蛋白表达IHC H评分截止（BOX1）预后亚群1L 2L 丨PROC mirv 1L 2L 丨PROC n197（rwPFS）159（ORR/DCR）31（rwPFS）20（ORR/DCR）65（rwPFS）63（ORR/DCR）187（TTNT）194（ORR/DCR）31（TTNT）43（ORR/DCR）结果指标rwPFS，ORR，DCR TTNT，ORR，DCR早期治疗景观反映了预期的SOC •几乎所有患者都接受了铂+紫杉烷双联作为1L治疗• 60%-62 %患者 纳入33%-50 % PARPI –在RESET中使用PARPI的可能性较低，因为纳入了非美国患者或在PARPI批准之前诊断的患者• 61%-63 %的患者接受了铂方案作为2L治疗，与1L治疗后预期的PSOC率一致•多柔比星是2L治疗中首选的化疗方案，用于PROC患者如图1。按治疗线分布的治疗方案对所有2L患者1% 99% 11% 38% 1% 41% 9% 20% 1% 4% 8% 1% 26% 18% 18% 18% 3% 18% 23% 11% < 1% 1% 41% 4% 6% 23% 10% 2% < 1% < 1% 30% 14% 99% 15% 3% 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00 0.25 0.50 0.75 1.00 1L 1LM 2L治疗线FR AC ti on o f P ati en ts FR AC ti on o f P ati en ts 1L 1LM 2L无其他贝伐珠单抗PARPI +贝伐珠单抗PARPI Azenosertib Mirvetuximab Taxane Gemcitabine Doxorubicin Platinum + Gemcitabine Platinum + Doxorubicin Platinum显示TLOV-2L（A）和RESET-2L（B）在1L、1LM和2L治疗期间接受每个基础方案的患者比例。图2。TLOV和RESET20 % 50% 31% 40% 30% 30% 0.00 0.25 0.50 0.75 1.00Fr ac ti对o f P ati en ts RESET − 1L（N = 271）TLOV − 1L（N = 153）的1L铂反应对比•从有足够随访时间的1L患者来看，RESET包括更多的1L-PROC患者（40% vs 20%）每个队列的患者百分比在每个PFI范围内（小于6个月、6-12个月之间或超过12个月）。生物标志物流行率在患者亚群之间存在差异• TLOV和RESET之间Cyclin E1阳性流行率的差异很可能归因于RESET中纳入标准和幸存者偏差的差异。跨子集的趋势保持一致–与1L丨PSOC相比，1L 丨PROC更容易被CCNE1放大，Cyclin E1阳性或BRCAWT –与1L-PSOC +患者相比，2L患者更有可能是CCNE1扩增或Cyclin E1阳性图3：跨队列的生物标志物流行率患者子集37% 38% 33% 40% 46% 38% 41% 58% 53% 51% 66% 58% 49% 79% 20% 22% 18% 28% 23% 15% 17% 31% 26% 20% 44% 32% 25% 26% 16% 19% 26% 0% 9% 8% 17% 14% 17% 18% 9% 15% 16% 26% 0255075100 PR ev al en ce（%）203N = 12376309813700255075100 PR ev al en ce（%）N = 0204060 PR ev al en ce（%）N = PR ev al en ce（%）N = 01020304050 PR ev al ence（%）N = PR ev al en ce（%）N = 020406001020304050273162811093094324 199122762996137014010654321613623 199122762996137022714066852583823 1L 1L PROC 1L PSOC 1L PSOC + 2L Taxane Mirv A B C D E F CyCE1 +（TLOV）CyCE1 +（RESET）CCNE1 − amp（TLOV）CCNE1 − amp（RESET）BRCAm（TLOV）BRCAm（RESET）Cyclin E1阳性（A，B）、CCNE1扩增（C，D）的流行率，和BRCA1/2突变（E，F）在来自TLOV（A，C，E）和RESET（B，D，F）队列的不同患者亚群中。Cyclin E1阳性定义具有队列特异性（见方框1）。误差条表示95%的置信区间。临床结果特征TLOV RESET 1L 2L PROC MIRV 1L 2L PROC检查率49%（96/197）42%（13/31）31%（20/65）0%（0/187）0%（0/31）中位观察11.7m 2.8m 4.6m 12.5m 5.1m中位随访23.3m 11.8m 11.2m-中位rwPFS/TTNT 16.7m 3.7m 6.6m 12.5m 5.1m ORR 90%（143/159）20%（4/20）38%（24/63）66%（124/188）14%（6/43）DCR 94%（150/159）55%（11/20）57%（36/63）88%（166/188）42%采用反向KM和KM法分别计算中位随访和中位rwPFS（TLOV）/TTNT（RESET）。ORR是患者达到CR或PR的比例。DCR是实现CRR、PR或SD的比例。未根据RECIST标准对回复进行裁决。Cyclin E1阳性患者在1L图4后预后更差。生存分析1L治疗后按周期蛋白E1状态分层757266493524221511888211122115997361464230251510853111010810384553119171285320077757167473227231715151386 5cyce1-cyce1 +风险人数cyce1-cyce1 +风险人数p = 0.10025507510003691215182124273033363942月% P ro gr es si on − f re e p = 0.00083025507510003691215182124273033363942个月% N ex t t re at m en t-fr ee TLOV-1L reSET-1L mPFS（95% CI）HR（95% CI）CYCE1 + 13.5（11.7-19.1）1.4（0.93-2.1）CYCE1-18.9（14.4-25.1）Ref MTTNT（95% CI）HR（95% CI）CYCE1 + 12.0（10.8-12.9）1.7（1.2-2.3）CYCE1-13.3（12.0-15.6）Ref A B rwPFS或TTNT根据TLOV-1L中的Cyclin E1状态进行比较（A；n = 197）而在RESET-1L（b；n = 187）中。MPFS、MTTNT、 和95% CI的HR在插入表中显示。P值来自log-ranked test。参考文献指出了COX比例HR计算的参考组。Cyclin E1阳性患者，无论CCNE1扩增，在1L图5后的结果更差。1L治疗后生存分析，按Cyclin E1分层和CCNE1状态cyce1 +/nonamp cyce1-cyce1 +/amp cyce1 +/nonamp cyce1 +/nonamp cyce1-cyce1 +/amp number at risk number at risk 32313125161296222221004140332419139964221112011397716045413025151085312222222222113722222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222222161310998544025507510003691215182124273033363942个月025507510003691215182124273033363942个月p = 0.18 p = 0.0021 TLOV-1L reSET-1L % P ro gr es si on − f re e % N ex t t re at m en t-fr ee mPFS（95% CI）HR（95% CI）cyce1 +/amp 13.6（11.4-20.0）1.6（0.97-2.6）cyce1 +/nonamp 13.5（10.5-25.5）1.2（0.72-1.99）MTTNT（95% CI）HR（95% CI）CYCE1 +/AMP13.2（10.2-16.0）2.9（1.6-5.2）CYCE1 +/NNONamp 14.9（12.5-20.7）1.6（0.94-2.8）CYCE1-18.9（14.4-25.1）Ref CYCE1-19.5（13.3-23.7）Ref A B rwPFS或TTNT根据TLOV-1L（A；n = 193）和RESET-1L（B；n = 79）中的Cyclin E1和CCNE1状态进行比较。95% CI的MPFS、MTTNT和HR见插图表格。P值来自log排序测试。参考文献指出了COX比例HR计算的参考组。TLOV和RESET图6中的一线预后分层汇总。以Cyclin E1、CCNE1、和BRCA/一线维护状态危险比危险比1/161/81/41/21241/81/41/21248 Ref 1.39（0.93 − 2.07）Ref 1.59（0.97 − 2.60）1.20（0.72 − 1.99）Ref 0.26（0.11 − 0.62）1.13（0.34 − 3.74）1.13（0.72 − 1.78）1.32（0.66 − 2.63）0.10 50.06 80.48 70.00 30.84 30.59 60.42718.9（14.4 − 25.1）13.5（11.7 − 19.1）18.9（14.4 − 25.1）13.6（11.4 − 20.0）13.5（10.5 − 25.5）16.1（11.7 − 23.2）NA（25.5 − NA）14.8（13.1 − NA）14.2（12.9 − 20.2和CCNE1扩增状态（图5B）BRCA突变状态和一线维持方案类型BRCA突变状态和一线维持方案类型cyce1 − cyce1 + cyce1 − cyce1 +/cCNE1 − amp cyce1 +/cCNE1 − nonamp BRCAWT/no 1lm BRCAM/pARPI BRCAM/no 1lm BRCAWT/pARPI BRCAWT/other 1lm cyce1 − cyce1 + cyce1 − cyce1 +/cCNE1 − amp cyce1 +/cCNE1 − nonamp BRCAWT/no 1lm BRCAM/pARPI BRCAM/no 1lm BRCAWT/pARPI BRCAWT/other 1lm 122/197（62%）75/197（38%）120/193（13.3 − 23.7）13.2（10.2 − 16.0）14.9（12.5 − 20.7）10.7（8.54 − 12.0）18.0（13.3 − 27.7）9.87（3.78 − 31.9）14.0（11.6 − 17.0）13.5（12.5 − 16.3）TLOV-1L N/N分层（%）HR（95% CI）p MPFS（95% CI）RESET-1L n/N分层（%）HR（95% CI）p MTTNT（95% CI）TLOV 1L RESET 1L A B（A）RWPFS跨TLOV-1L分层危险比。（b）RESET-1L中跨层的TTNT危险比。显示95% CI的HR。Ref表示每个变量的参考组（HR = 1.0）。95% CI的中位数PFS或TTNT（MPFS/mTTNT）以月为单位报告。n/n表示每个亚组中超过患者总数的事件数。P值由考克斯比例风险回归得出。分层对应于图4和图5。2L非铂类化疗治疗的PROC患者预后较差• 2L治疗的PROC患者，无论周期蛋白E1状态如何，预后均较差。•疾病进展迅速，加上样本量（N）有限，限制了分析的统计敏感性•尽管如此， 在周期蛋白E1阳性组图7中观察到无进展生存期（TLOV）或下一次治疗时间（RESET）缩短的趋势。1L 丨PROC患者生存分析经2L治疗分层的周期蛋白E1状态cyce1-cyce1 +风险人数cyce1-cyce1 +风险人数128111111913987542020131033211117554302550751000246812个月% P ro GR es si on − f re e 0 25507510002468 101012个月% N ex t t t re at m en t-fr ee p = 0.35 p = 0.40TLOV-2L PROC RSET-2L PROC MPFS（95% CI）RMST（95% CI）HR（95% CI）CYCE1 + 3.7（1.8-NA）5.7（1.0-10.3）1.6（0.55-4.5）CYCE1-5.3（1.9-NA）8.6（5.2-12.1）Ref MTTNT（95% CI）RMST（95% CI）HR（95% CI）CYCE1 + 5.6（3.8-7.1）6.5（4.8-8.1）1.4（0.65-3.1）CYCE1-4.5（3.2-13.3）7.9（4.8-10.9）Ref A B rwPFS或TTNT在TLOV-2L 丨PROC（A；n = 31使用RMST度量（tau = 18）是因为在TLOV和RESET中都违反了比例危险假设。95% CI的MPFS、MTTNT、RMST和HR显示在插入表中。P值来自log-ranked测试。参考文献指出了COX比例HR计算的参考组。Cyclin E1阳性与Mirv临床获益减少的趋势相关• TLOV Cyclin E1阳性患者在Mirv上表现出更高的进展率（52% vs 36%；NS）•注：由于队列规模有限和不平衡的Cyclin E1状态图8，未包括RESET-Mirv队列的预后。预后评估按周期蛋白E1状态分层的TLOV患者接受MirV治疗后11% 26% 11% 52% 6% 33% 25% 36% 0% 25% 50% 75% 100% CYCE1-（N = 36）CYCE1 +（N = 27）PE rc en ta ge o f P ati en ts BOR CR PR SD PD CYCE1-CYCE1 +风险人数27201612722138352215117611025507510002468 10161412个月% P ro gr es si on-f re e p = 0.30 TLOV-Mirv mPFS（95% CI）HR（95%CI）CYCE1 + 5.7（3.0-7.4）1.4（0.74-2.5）CYCE1-6.8（4.0-8.5）Ref A B BOR（a）和RWPFS（b）在TLOV-Mirv（n = 65）中根据Cyclin E1状态进行比较。95% CI的MPFS和HR在插入表中显示。P值来自log-ranked测试。参考文献指出了COX比例HR计算的参考组。背景•新疗法在临床开发的后期阶段取得进展时取得成功，需要对临床研究完成时护理标准（SOC）提供的益处进行准确的基准测试•从已发表的研究或回顾性登记中收集的信息可能已经过时或没有反映最新的SOC •此外，新型药物的开发——例如WEE1抑制剂azenosertib ——可能仅限于选定的人群，以前未在文献中进行过表征，可能是通过新的生物标志物等标准（例如，Cyclin E1阳性肿瘤）或适应症亚型（例如，先前治疗线少于N条的铂耐药卵巢癌[ PROC ]）•为高级别浆液性卵巢癌（HGSOC）的治疗景观构建一幅最新且真实的图景，包括生物标志物流行率和结果分层，我们利用了来自最近早期临床研究的RWD和筛查数据集方法队列描述• Tempus Lens卵巢癌（TLOV）–纳入标准：来自Tempus Lens的HGSOC患者（数据截止日期：05Sep2025）于2022年开始一线治疗或在任何时间接受MirV，并通过RNA-seq（Tempus xR测定）和DNA-seq（Tempus xT测定）分析其肿瘤组织（纯度≥ 20%）–治疗线和药物方案是根据Tempus Lens程序策划的。1额外的审查和人工审查澄清了使用维持方案的持续时间以及治疗线的顺序–结果：• rwPFS是根据Tempus Lens程序建立的。1简言之，rwPFS定义为从被调查的线开始到首次进展或因任何原因死亡之日的时间•客观反应是根据主要治疗肿瘤学家记录的总体疾病负担确定的。当评估由非初级医生提供时，只有在就诊是为了癌症症状审查时，才能获得结果。应答与相应的治疗线相关联。未根据RECIST标准判定应答–生物标志物状态：•通过肿瘤DNA测序试验（Tempus xT）获得基因组改变（CCNE1扩增和BRCA1/2突变）• Cyclin E1表达状态源自CCNE1 RNA表达水平和肿瘤纯度（见框1）•早期治疗（RESET）的Zentalis回顾性研究–纳入标准：•已参加以下azenosertib研究之一的铂类耐药卵巢癌患者：ZN-c3-001（NCT04158336）、MUIR/ZN-c3-002（NCT04516447）、DENALI（ZN-c3-005，Part1b； 无论方案和剂量如何•使用中心实验室Test2 – Treatment Lines和药物方案对Cyclin E1 IHC进行的肿瘤组织分析是通过eCRF从研究地点收集的。药物、治疗方案、治疗线、治疗意图、开始和结束日期在研究中协调一致并进行了策划–结果：•时间-下次治疗（TTNT）定义为从研究线开始到下一线治疗开始的时间•通过eCRF收集每条治疗线的客观反应–生物标志物状态•使用H-score（0、1 +、2 +和3 + DAB染色水平的细胞分数加权总和）总结周期蛋白E1表达的核表达。Cyclin E1阳性状态被定义为与中心实验室检测的CCNE1扩增的90%肿瘤的表达水平相等或更高的表达水平。注意：这一状态相似，但与正在进行的试验中调查其预测价值的状态（BOX1）不同•基因组改变是从对针对IHC或一组优先中心和局部报告（CCNE1扩增和BRCA1/2突变）进行分析的同一组织标本进行的Foundation Medicine F1CDx检测中获得的结论•周期蛋白E1阳性患者在TLOV和RESET的早期治疗中预后始终较差。该效果独立于CCNE1扩增状态出现，且队列间一致•使用维持治疗，在接受PARPI治疗的BRCAM患者中高度有效，正在改变传统PSOC/PROC人群1L后的特征，延长PROC病（2L 丨PROC，Mirv）中的预后较差。虽然队列的小规模限制了统计敏感性，但Cyclin E1阳性PROC患者可能不太可能从目前可用的治疗中受益•局限性：– RWD（即TLOV）和回顾性数据（即RESET）具有可能影响结果或其解释的独特特异性•生物标志物定义：两个Cyclin E1阳性定义都只是目前临床上正在研究的具有预测价值的Cyclin E1阳性的代理。差异会导致差异。同样，TLOV和RESET中的基因改变也依赖于不同的来源•结果的准确性和可靠性：– rwPFS受到患者RW监测和随访质量的影响– RESET依赖于现场报告的客观反应或治疗间隔持续时间（TTNT）•设计和纳入：– TLOV中有限的随访时间迅速降低了可评估的晚期患者的N – RESET中的生存偏差富集了1L 丨PROC患者和存活至试验入组参考文献1的PROC患者。https://www.tempus.com/life-sciences/lens/。2.ABed M，et al. Poster presented at：AACR-NCI-EORTC International Conference on Molecular Targets and Cancer Therapeutics；October 22 – 26,2025；Boston，MA。海报A011。3.Spiegelhalter DJ。Stat Med. 2005 Apr 30；24（8）：1185丨202。感谢本研究由Zentalis Pharmaceuticals, Inc.赞助。我们感谢Tempus AI Inc的Christian Anderson、Ben Barnhart、Ayano Kondo、Karson Lychuk和Livia Nguyen对Tempus Lens数据集的支持。我们感谢Zentalis临床开发和运营团队对azenosertib试验的设计和进行；作者感谢所有参与azenosertib试验的患者及其家属的支持。编辑支持由Second City Science，LLC提供。简称1L，一线；1LM，一线维持；2L，二线；amp，（拷贝数）扩增；BRCAM，BRCA1/2突变；BRCAWT，BRCA1/2野生型；CCNE1，Cyclin E1基因；CI，置信区间；CR，完全应答；CycE1，Cyclin E1；DAB，3,3 '丨二氨基联苯胺；DCR，疾控率；eCRF，电子病例报告表；HGSOC，高级别浆液性卵巢癌；HR，风险比；H评分，组织学评分；IHC，免疫组织化学；Mirv，mirvetuximab soravtansine；mPFS，中位无进展生存期；NPV，阴性预测铂敏感卵巢癌；参考文献，参考资料；RESET，早期治疗的回顾性研究；RMST，限制平均生存期；ROC，受体操作特征；RWD，真实世界数据；rwPFS，真实世界无进展生存期；SD，疾病稳定；SOC，护理标准；TLOV，Tempus Lens卵巢癌队列；TTNT，下次治疗时间。发表于：美国癌症研究协会（AACR），2026年4月17日-22日，美国加利福尼亚州圣地亚哥海报# 1052真实世界的治疗模式和结果揭示了周期蛋白E1阳性卵巢癌患者的不同临床轨迹Jinkil Jeong1，Mona Abed1，Catherine Lee1，Heekyung Chung1， Alexandra Levy1，Nandini Molden1，Divya Rajendran1，Joyce F. Liu2，Leslie M. Randall3，Fiona Simpkins4，Funda Meric丨Bernstam5，Danielle D. JandiL1，Doris Kim1，Olivier Harismendy1 1Zentalis Pharmaceuticals，Inc. San Diego，加利福尼亚州，美国；美国马萨诸塞州波士顿2Dana丨Farber癌症研究所；美国弗吉尼亚州费尔法斯Inova Health System Inova Schar癌症研究所3妇科肿瘤临床研究和妇科癌症服务专线；美国宾夕法尼亚州费城宾夕法尼亚大学宾夕法尼亚大学卵巢癌症研究中心妇产科4妇科肿瘤科；5研究性癌症治疗学系，